微生物菌種培養液是供微生物菌種生長發育、繁育、新陳代謝的混和養分。因為微生物菌種具備不一樣的營養成分種類,對營養元素的規定也不盡相同,加上科學研究的目地不一樣,因此培養液的類型許多,應用的原材料也都有差別,但從營養成分視角剖析,微生物菌種培養液中一般帶有微生物所有的氮源、氮源、碳酸鹽、生長素及其水份等。此外,培養液還應具備適合的pH值、一定的緩存工作能力、一定的氧化還原反應電位差及適合的血漿滲透壓。以便做到特殊規定的科學研究,需要開展培養液配置和殺菌,那麼微生物菌種培養液該怎樣配置與殺菌呢?
方法:
1、儀器設備滅菌:化學滅菌、輻射滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌
化學滅菌主要針對器皿、雙手和實驗室、無菌室的環境滅菌,使用甲醛、高錳酸鉀等滅菌劑;
用輻射滅菌于室內空氣及器皿表面滅菌,如常用的有紫外線、X射線和γ射線。
干熱滅菌一般常用灼燒和電熱箱加熱,140-180℃ 1-2小時。適于對玻璃及金屬用具及沙土管滅菌。
濕熱滅菌指的是水煮常壓滅菌:100℃、或飽和蒸汽滅菌:一般121℃,30分鐘。適合培養基或發酵的設備滅菌
2、培養液或/發酵液:過濾除菌
過濾除菌原理是利用微生物不能透過濾膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔徑濾膜,利用負壓過濾或壓縮空氣用于酶溶液及其他不耐熱化合物溶液除菌
過濾除菌常用的負壓抽濾裝置:
500ml以下容量培養液除菌的話,可以采用R300-LF50-500,可以把500ml的血清瓶放入抽濾瓶里,過濾后的液體直徑引入血清瓶,然后取出保存。配置的漏斗為500ml容量,可以一次性過濾完500ml(含)以下容量的培養基。配置的漏斗、抽濾瓶、血清瓶均可蒸汽高壓滅菌。
大容量的培養基除菌,采用L200-5CPES,配置的圍籬笆式一體真空泵,可以放置3000ml的血清瓶,不會產生因外界產生的磕碰等原因,導致抽濾瓶傾斜摔倒,至培養液流掉浪費。而且可以根據需求更換小于3000ml的GL45血清瓶作為抽濾瓶,靈活方便。配置的漏斗及血清瓶、GL45轉接器、矽膠管均可蒸汽121°滅菌,確保設備的無菌。
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